جزئیات محصول:
پرداخت:
|
| موقعیت: | غشایی | تایپ کنید: | پروتئین های کانال یونی |
|---|---|---|---|
| ظاهر: | لیوفیلیزه یا مایع | مگاوات: | 40 کیلو دالتون |
| سیستم CFPS: | عصاره E. coli | ابزار: | نانودیسک |
| برجسته: | Alpha Hemolysin Cell Free Protein,E.Coli Lysates Cell Free Protein,40 kDa Cell Free Protein |
||
شرکت ما همولیزین آلفا ، سم باکتریها ، پروتئین عاری از سلول جدا شده توسط نانودیس ها ، بر اساس لیزاهای E.coli برای بیان عاری از سلول ارائه می دهد. پروتئین بدون سلول بوده استعملکرد تأیید شده است.
مقدمه
در مبارزه خود برای منابع ، باکتری استافیلوکوکوس اورئوسترشح مونومرهای آلفا همولیزین که به غشای خارجی سلولهای مستعد متصل می شوند.پس از اتصال ، مونومرها الیگومریزه می شوند تا یک کانال ترانس ممبرنی پر از آب تشکیل دهند که نفوذ کنترل نشده آب ، یون ها و مولکول های آلی کوچک را تسهیل می کند.ترشح سریع مولکولهای حیاتی ، مانند ATP ، اتلاف پتانسیل غشای غشایی و شیب یونی و تورم اسمزی غیرقابل برگشت که منجر به پارگی دیواره سلولی (لیز) می شود ، می تواند باعث مرگ سلول میزبان شود.این خاصیت منافذ به عنوان مکانیسم اصلی شناخته شده است که با استفاده از آن سموم پروتئین می توانند به سلولها آسیب وارد کنند.نام "آلفا همولیزین" از مشاهدات اولیه ناشی از فعالیت لیتیک سم بر روی گلبولهای قرمز ناشی می شود.انتظار می رود در حال حاضر ، اگر در دوز کافی استفاده شود ، آلفا همولیزین بتواند در هر غشای سلولی پستانداران نفوذ کند.اگرچه برای اکثر ترشحات آلفا همولیزین در اکثر جمعیت انسان خطری جدی برای سلامتی ایجاد نمی کند ، می تواند عفونت شدید استافیلوکوکی ایجاد کند.هموستازاغتشاشات، ترومبوسیتوپنیو ریوی ضایعات .
ساختار بلوری از جمع آوری آلفا همولیزین نشان داد که یک سازمان heptametric کانال.پروتئین شکل قارچ مانند دارد و یک ساقه بتا بشکه ای 50A از قسمت درپوش از طریق لایه لایه لیپیدی داخل قسمت سلول بیرون زده می شود.درپوش پروتئین ، هشتی بزرگ را که از طریق بازشوی بزرگی در بالای درپوش وصل شده است به قسمت بیرونی سلول پنهان می کند.باریکترین قطر (قطر 1.4 ~ نانومتر) کانال در پایه ساقه قرار دارد ، جایی که منافذ بتا-بشکه به هشتی متصل می شود.هفت کانال جانبی از هشتی به قسمت بیرونی سلول منتهی می شوند و در نزدیکی سطح غشای خارج می شوند.این شکل مدل 268000 اتمی آلفا-همولیزین را در محیط بومی خود نشان می دهد - یک لایه لایه لیپید.
کاربرد
چندین خاصیت آلفا همولیزین باعث شده است که این کانال غشایی برای کاربردهای مختلف بیوتکنولوژیک مناسب باشد: مونتاژ آلفا-همولیزین در طیف گسترده ای از pH و دما پایدار است ، منافذ ترانسمیبرون آن در شرایط عادی باز است ، آلفا-همولیزین می تواند به انواع مختلف بیولوژیکی یا مصنوعی متصل شود. اتصال دهنده های چربی ، اتصال به صورت خود به خود ادامه می یابد و به شرایط خاص یونی احتیاج ندارد.
آ. سیستم های تحویل. منافذ transmembrane آلفا همولیزین می تواند تحویل کنترل شده یونها و ترکیبات آلی کوچک مانند قندها یا نوکلئوتیدها را از طریق غشای پلاسمایی سلول یا از طریق دیواره های وزیکولهای چربی مصنوعی تسهیل کند.با استفاده از آلفا همولیزین های مهندسی ژنتیکی ، که برای آن مونتاژ و هدایت توسط محرکهای بیوشیمیایی یا فیزیکی خارجی از جمله نور می تواند روشن یا خاموش شود ، یک لایه لیپید چربی می تواند برای املاح کوچک قابل تنظیم باشد.
ب سنسورهای تصادفی.هنگامی که یک آداپتور مولکولی در داخل بنیه مجدداً ژنتیکی قرار گرفته باشد ، یک کانال آلفا-همولیزین به حالت تعلیق در لایه لیپید تبدیل می شود و بر جریان یونی ترانسمیبن ناشی از تعصب ولتاژ اعمال می شود.اتصال برگشت پذیر آنالیت ها به آداپتور مولکولی به طور موقت جریان یونی را کاهش می دهد.مقدار کاهش جریان نشان دهنده نوع آنالیت است ، در حالی که فرکانس فواصل کاهش جریان نشان دهنده غلظت آنالیت است.چنین سنسورهای تصادفی اندازه گیری همزمان با یک عنصر حسگر واحد ، غلظت چندین آنالیت آلی و غلظت محلول دو یا چند یون فلزی دوتایی نشان داده شد.منافذ اندازه نانومتر آلفا-همولیزین در نوع دیگری از سنسور تصادفی استفاده شد تا همزمان غلظت دو پروتئین مختلف تعیین شود.
ج توالی DNA منافذ transmembrane آلفا همولیزین می تواند نه تنها املاح کوچک ، بلکه ماکرومولکول های خطی نسبتاً بزرگ (ده ها کیلو دالتون) را نیز انجام دهد.بنابراین ، با استفاده از یک پتانسیل transmembrane ، رشته های DNA یا RNA می توانند از درون منافذ آلفا همولیزین جابجا شوند و محاصره جریان یونی را تولید می کنند که منعکس کننده ساختار شیمیایی رشته های فردی است.تجزیه و تحلیل آماری بسیاری از جریانهای مسدودکننده این امکان را به محققان داده است تا توالی های مختلف RNA و هموپلیمرهای DNA و همچنین بخشهای نوکلئوتیدهای پورین و پیریمیدین را در یک مولکول RNA متمایز کنند.وضوح یک نوکلئوتید منفرد برای موهای پشتی DNA نشان داده شده است ، و چشم انداز ایجاد یک سنسور نانوپور قادر به خواندن دنباله نوکلئوتیدی به طور مستقیم از یک رشته DNA یا RNA را نشان می دهد.
ساختار
ساختار چند همولیزین به وسیله کریستالوگرافی اشعه ایکس در ترکیبات محلول و منافذ حل شده است.به عنوان مثال ، α- همولیزین ازاستافیلوکوکوس اورئوسبشکه هومپتامریک β- بشکه در غشاهای بیولوژیکی تشکیل می دهد.ویبریوکلرا با این حال ، سیتولیزین نیز منافذ هپتامریک را تشکیل می دهد استافیلوکوکوس اورئوس γ-همولیزین منافذی را تشکیل می دهد که اکتامریک است.
هپتامر α- همولیزین از استافیلوکوکوس اورئوسدارای شکل قارچ است و اندازه آن تا 100 Å قطر و 100 Å قد دارد.یک کانال با دسترسی به حلال با غشاء و فرآیندهای غشایی ، در امتداد محور هفت برابر حرکت می کند و قطر آن از 14 تا 46 است.در قسمت بیرونی بشکه ضد بتنی 14 رشته ای باند ، یک کمربند آبگریز با عرض 30 Å عرض وجود دارد که یک سطح مکمل برای قسمت غیر قطبی لایه لایه لیپیدی را فراهم می کند.واسطها از هر دو پیوند نمکی و پیوندهای هیدروژن و همچنین برهم کنش های آبگریزی تشکیل شده اند و این تماس ها باعث ایجاد پایداری مولکولی برای هپتامر در SDSsolutions حتی تا 65 درجه سانتیگراد می شوند.
